“三千亿级多样性”抗体库的构建（AI辅助设计）

背景：

利用噬菌体展示技术构建的天然全人源抗体库有着多样性低（10⁷ ~ 10⁸）的固有缺点，因而降低了其抗体的筛选成功率。而全合成库技术的出现则克服了这种缺点，全合成库技术以已有的抗体为模板，在抗体的互补决定区（complementarity-determining regions,CDR）进行高通量的突变，所获得的突变Fab/scFv/VHH噬菌体小库多样性可达到10¹⁰。由ABLINK所开发的‘三千亿级多样性’抗体库包含了多个全合成抗体大库，每个大库包含了二十至八十个小库。

流程：

全合成人源化Fab抗体库

1. 选择表达好、亲和力高的抗体单克隆为模板。

2. 基因全合成pelB-VL-CH1和pelB-VH-CH1的串联DNA，克隆到噬菌粒。

3. 利用Kunkel法对VL和VH 的CDR区域进行高通量突变，构建突变Fab DNA文库。

4. 将DNA文库电转入超级感受态细胞（含helper phage）中，构建突变Fab噬菌体库亚库。

5. 将多个亚库混合形成全合成人源化Fab抗体库。

全合成人scFv抗体库

1. PCR扩增人抗体胚系基因DP47H和DPK22、DPL11，克隆到普通载体上。

2. 使用IUB code简并引物PCR突变CDR区域，overlap PCR构建DP47H-linker-DPK22和DP47H-linker-DPL11 scFv，克隆到噬菌粒上，构建突变scFv DNA文库。

3. 将DNA文库电转入感受态细胞（含helper phage）中，构建突变scFv噬菌体库亚库。

4. 将多个亚库混合形成全合全合成人scFv抗体库。

服务特色及优势：

1. 针对突变方法的优化、电转条件的优化和感受态细胞的改造而带来的多点位100%突变效率和实现单次电转10¹¹的克隆。

2. 在突变引物设计上的丰富经验和AI的辅助带来的效率上的提升。