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全人抗体库构建

背景:

治疗性单克隆抗体的发展经历了四个阶段,分别为:鼠源抗体、人鼠嵌合抗体、人源化抗体和全人源抗体。其中全人源抗体的可变区(Fab)与恒定区(Fc)都是人源的,免去了由于鼠源片段而导致的免疫源性和毒副作用,使其成为了目前治疗性抗体的主要发展方向。而噬菌体抗体库技术的出现为全人源抗体的制备提供了一条简便、快捷的制备路线,逐渐成为目前获得全人源抗体的主要方法之一。

 

服务流程:

ABLINK采用未经免疫的健康人外周血淋巴细胞为材料,以从细胞mRNA反转录而来的cDNA为模板进行PCR扩增,获得抗体的重链和轻链可变区(VH和VL)基因文库。之后利用overlap PCR 将VH和VL连接成单链抗体(scFv),并利用Gibson Assembly将scFv克隆至噬菌粒中,电转感受态细胞,并辅以辅助染色体(helper phage)感染以构建天然全人噬菌体小库。由多个小库合并成的全人抗体大库库容量能够大于1010

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