抗体封闭肽（AI亲和力预测）

背景：

封闭肽是特异性结合靶抗体并阻断抗体结合的肽，这些肽通常含有抗体识别的表位，与封闭肽结合的抗体不再与靶蛋白上的表位结合。当某些抗体因为其非特异性结合而导致外周毒性时，封闭肽能够封闭抗体并在抗体到达肿瘤部位时利用酶切与抗体脱离，以暴露抗体的活性部分，杀伤肿瘤细胞。

流程：

对于封闭肽的筛选离不开对于随机多肽库的构建，ABLINK利用NNK简并引物构建随机多肽文库，并允许构建线性肽和环肽文库，同时允许将多肽链接到噬菌体不同蛋白上（图1）。

相对于常规筛选，封闭肽筛选的一大要求即使筛选拥有合适亲和力的封闭肽。亲和力过高的封闭肽与抗体永久结合难以脱离，而太弱的封闭肽易在抗体到达肿瘤前脱离。因此在对封闭肽的筛选的洗脱（elution)一步中利用不同浓度抗原洗涤抗体（图2），富集的克隆在扩增后利用ELISA/竞争性 ELISA验证（图3）去点马赛克，选取IC50值合适的多肽。