多次跨膜蛋白的抗体筛选

背景:

跨膜蛋白是一类拥有疏水性跨膜区域，通过嵌入细胞膜磷脂双分子层跨越细胞内外环境的蛋白分子。跨膜蛋白功能繁多，相比于单次跨膜蛋白，多次跨膜蛋白能够形成疏水孔道，发挥运输的功能，亦可作为信号受体（G蛋白）完成复杂信号的传导。许多人类疾病或许都与异常的跨膜蛋白功能有关，跨膜蛋白的多功能性使它们成为理想的药物作用靶点。

服务流程：

相较于其他抗原多跨膜蛋白由于其分子量大、结构复杂，使得其重组蛋白制备困难，因而对抗多次跨膜蛋白抗体的筛选选择在细胞表面上进行抗原展示。抗原细胞表面展示有其固有缺点，展示在过表达细胞表面的除了目标抗原外，还存在其他无关抗原，因而直接进行筛选得出的抗体特异性差。针对此问题，ABLINK在常规筛选流程前引入了预先清洗（pre-clear）步骤，通过将不表达目标抗原的阴性细胞先与抗体库结合筛掉与无关抗原结合抗体，再将清洗后的抗体库与过表达细胞结合，经过3-5轮的富集筛选之后再将阳性克隆进行phage FACS/IF验证。由ABLINK优化的cell panning流程同时支持对于内吞型抗体的筛选。